利拉魯肽2025全攻略!(震驚真相)

在一些具體實施例中,流動相D包括15 mM甲酸銨之水溶液與乙腈;以及pH值為約8.3,其中水溶液與乙腈之體積比率為50與50。 在一些具體實施例中,流動相C包括15 mM甲酸銨之水溶液。 在一些具體實施例中,流動相C包括15 mM甲酸銨之水溶液;以及pH值為約8.3。 在一些具體實施例中,流動相C包括乙腈與15 mM甲酸銨之水溶液;以及pH值為約8.3,其中水溶液與乙腈之體積比率為95與5。 在一些具體實施例中,流動相D進一步包括體積百分比10至60%之量的銨鹽水溶液。 在一些具體實施例中,流動相D進一步包括體積百分比20至60%、30至60%、40至60%或約50%之量的銨鹽水溶液。

利拉魯肽

儘管採用上述之純化方法,但仍需開發更高效及改進的方法,以純化司美格魯肽或利拉魯肽。 在某些具體實施例中,經純化的利拉魯肽組份的pH值為約7.5至約8.5。 在某些具體實施例中,經純化的利拉魯肽組份的pH值為約8.0至約8.5。

利拉魯肽: 利拉魯肽

在一些具體實施例中,銨鹽係選自於由甲酸銨、乙酸銨及其混合物組成之群組。 在一些具體實施例中,流動相C進一步包括體積百分比1至10%之量的乙腈。 在一些具體實施例中,流動相C進一步包括體積百分比3至7%之量的乙腈。 在一些具體實施例中,流動相C進一步包括體積百分比約5%之量的乙腈。

利拉魯肽

如申請專利範圍第6項所述之方法,其中步驟中的溶液包括體積百分比20-30%的2,2,2-三氟乙醇和0.1-1%的氟化酸。 在某些具體實施例中,流動相C包括在水中濃度為5-50 mM的銨鹽或磷酸鹽。 利拉魯肽 在某些具體實施例中,流動相C包括在水中濃度為10-40 mM的銨鹽或磷酸鹽。

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具體而言,前述方法於樣品製備步驟中使用一鹵化溶劑,該溶劑具備較佳溶解度,且可提供適合利拉魯肽粗肽於RP-HPLC純化前脫羧的環境。 具體實施例 28:如具體實施例 26之方法,其中步驟之溶液包含體積百分比20-30%之2,2,2-三氟乙醇與0.1-1%之氟化酸。 在一些具體實施例中,流動相C包括含有濃度為5至50 mM之銨鹽或磷酸鹽的水。 在一些具體實施例中,流動相C包括含有濃度為10至40 mM之銨鹽或磷酸鹽的水。

在一些具體實施例中,步驟之溶液包括體積百分比20-30%之2,2,2-三氟乙醇與0.1-1%之氟化酸。 在一些具體實施例中,步驟之溶液包括體積百分比15-20%之1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇與0.1-1%之三氟乙酸。 在一些具體實施例中,步驟之溶液包括體積百分比20-30%之2,2,2-三氟乙醇與0.1-1%之三氟乙酸。 在一些具體實施例中,步驟之溶液包括體積百分比15-20%之1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇與0.1-0.3%之三氟乙酸。 利拉魯肽 在一些具體實施例中,步驟之溶液包括體積百分比20-30%之2,2,2-三氟乙醇與0.1-0.3%之三氟乙酸。 在一些具體實施例中,步驟之溶液包括體積百分比約17%之1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇與約0.2%之三氟乙酸。

利拉魯肽: 利拉魯肽

在某些具體實施例中,步驟中的溶液包括體積百分比20-30%的2,2,2-三氟乙醇(TFE)和0.1-1%的三氟乙酸。 在某些具體實施例中,步驟中的溶液包括體積百分比15-20%的1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(HFIP)和0.1-0.3%的三氟乙酸。 在某些具體實施例中,步驟中的溶液包括體積百分比20-30%的2,2,2-三氟乙醇(TFE)和0.1-0.3%的三氟乙酸。

第一次和第二次純化的流速取決於RP-HPLC製備管柱的尺寸。 在某些具體實施例中,當管柱的直徑和長度為5 cm × 22 cm至8 cm × 12.6 cm時,第一次純化的流速為約50至200 mL/min。 在某些具體實施例中,當管柱的直徑和長度為5 cm × 22 cm至8 cm × 12.6 cm時,第一次純化的流速為約100至160 mL/min。 在某些具體實施例中,當管柱的直徑和長度為5 cm × 22 cm時,第一次純化的流速為約104 mL/min。 在某些具體實施例中,當管柱的直徑和長度為8 cm × 12.6 cm 時,第一次純化的流速為約152 mL/min。 在某些具體實施例中,當管柱的直徑和長度為10 mm × 250 mm 時,第一次純化的流速為4至8 mL/min。

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將30 g之粗利拉魯肽溶於500 mL之三氟乙醇溶液(含有25% TFE之0.2%三氟乙酸)中。 具體實施例 39:如具體實施例 34之方法,其中流動相D係以體積百分比0-10 %至50-100%之線性梯度沖提。 具體實施例 37:如具體實施例 34之方法,其中流動相C包含在水中濃度為5至50 mM之銨鹽或磷酸鹽。

  • 在某些具體實施例中,磷酸鹽選自由磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸氫二銨、磷酸二氫銨及其混合物組成的群組。
  • 在一些具體實施例中,流動相C包括含有濃度為約15 mM之銨鹽或磷酸鹽的水。
  • 具體實施例 28:如具體實施例 26之方法,其中步驟之溶液包含體積百分比20-30%之2,2,2-三氟乙醇與0.1-1%之氟化酸。
  • 如申請專利範圍第9項所述之方法,其中該第一次RP-HPLC純化於pH小於3時進行;且該第二次RP-HPLC純化於pH大於7.5時進行。
  • 特別的是,本方法在樣本製備步驟中使用鹵化溶劑,其提供粗司美格魯肽或粗利拉魯肽在RP-HPLC純化前之更佳溶解度及適合脫羧反應的環境。
  • 在一些具體實施例中,步驟之溶液包括體積百分比20-30%之2,2,2-三氟乙醇與0.1-1%之三氟乙酸。

在某些具體實施例中,流動相D進一步包括體積百分比10%至60%的銨鹽水溶液。 在某些具體實施例中,流動相D進一步包括體積百分比20%至60%、30%至60%、4%至60%或約50%的銨鹽水溶液。 在某些具體實施例中,流動相D進一步包括體積百分比約50%的銨鹽水溶液。 在某些具體實施例中,流動相A及流動相B各包括體積百分比0.1-1%的三氟乙酸。 在某些具體實施例中,流動相A及流動相B各包括體積百分比0.1-0.5%的三氟乙酸。

利拉魯肽: 利拉魯肽

在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為10 mm x 250 mm時,第一次純化之流速為約4.7 mL/min。 在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為5 cm x 22 cm至8 cm x 12.6 cm時,第二次純化之流速為約50至200 mL/min。 在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為5 cm x 22 cm至8 cm x 12.6 cm時,第二次純化之流速為約100至160 mL/min。 在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為8 cm x 12.6 cm時,第二次純化之流速為約152 mL/min。 在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為4.6 mm x 100 mm時,第二次純化之流速為約0.3至0.5 mL/min。

利拉魯肽

如申請專利範圍第9項所述之方法,其中該第一次RP-HPLC純化於pH小於3時進行;且該第二次RP-HPLC純化於pH大於7.5時進行。 一種純化利拉魯肽的方法,包含:將利拉魯肽粗肽溶於包含鹵化溶劑的溶液中;及將該溶液置於RP-HPLC純化系統中純化,並收集經純化的利拉魯肽組份。 本發明內容已藉由前文的具體實施例及實例詳述,以使概念清晰易懂,但所屬技術領域具通常知識者將了解,可在所附請求項界定的範圍內對本發明進行特定變化和修飾。

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在某些具體實施例中,磷酸鹽選自由磷酸三鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸三鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸三銨、磷酸氫二銨、磷酸二氫銨及其混合物組成的群組。 在某些具體實施例中,磷酸鹽選自由磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸氫二銨、磷酸二氫銨及其混合物組成的群組。 利拉魯肽 在某些具體實施例中,磷酸鹽選自由磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀及其混合物組成的群組。

在某些具體實施例中,流動相B於線性梯度下由體積百分比5-25%被沖提至80-100%,其中流動相A為水中含0.2%三氟乙酸的溶液;流動相B為乙腈中含約0.2%三氟乙酸的溶液。 在某些具體實施例中,流動相B於線性梯度下由體積百分比5-15%被沖提至90-100%,其中流動相A為水中含0.2%三氟乙酸的溶液;流動相B為乙腈中含約0.2%三氟乙酸的溶液。 利拉魯肽 在某些具體實施例中,流動相B於線性梯度下由體積百分比約10%被沖提至95%,其中流動相A為水中含0.2%三氟乙酸的溶液;流動相B為乙腈中含約0.2%三氟乙酸的溶液。

利拉魯肽: Q1. 使用Saxenda善纖達(瘦瘦筆)注射時,會不會很疼痛?

在一些具體實施例中,流動相D係以體積百分比0-10%至50-100%之線性梯度沖提。 在一些具體實施例中,依據梯度表2,流動相D係以體積百分比5至70%之線性梯度沖提,其中流動相C為15 mM甲酸銨之水溶液且pH值為約8.3;以及流動相D為乙腈。 在某些具體實施例中,該方法進一步包括: 使用包含鈉鹽、水和乙腈的流動相E對步驟中的組份進行第三次RP-HPLC純化;並收集組份以取得鹽交換的利拉魯肽。 具體實施例 41:如具體實施例 21之方法,其進一步包含: 將步驟之分液進行第三次RP-HPLC純化,其使用包含鈉鹽、水及乙腈之流動相E;以及收集分液以取得鹽交換之利拉魯肽。 在一些具體實施例中,其進一步包含: 將步驟之分液進行第三次RP-HPLC純化,其使用包含鈉鹽、水及乙腈之流動相E;以及收集分液以取得鹽交換之利拉魯肽。

利拉魯肽

在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為4.6 mm x 100 mm時,第二次純化之流速為約0.4 mL/min。 本方法包括: 將粗利拉魯肽溶於包含鹵化溶劑之溶液中;以及 將溶液置於RP-HPLC純化系統中,並收集經純化之利拉魯肽分液。 在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為10 mm x 250 mm時,第三次純化之流速為4至8 mL/min。 在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為10 mm x 25 cm時,第一次純化之流速為約4.7 mL/min。

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在一些具體實施例中,流動相C之pH值為約7.5至約8.5。 在一些具體實施例中,流動相D之pH值為約7.5至約9.0或約7.5至約8.5。 在一些具體實施例中,流動相D之pH值為約7.5至約8.5。

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在某些具體實施例中,步驟中的溶液包括體積百分比約17%的1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(HFIP)和約0.2%的三氟乙酸。 在某些具體實施例中,步驟中的溶液包括體積百分比約25%的2,2,2-三氟乙醇(TFE)和約0.2%的三氟乙酸。 具體實施例 34:如具體實施例 29之方法,其中第二次RP-HPLC純化使用包含銨鹽或磷酸鹽之流動相C及包含乙腈之流動相D。 具體實施例 27:如具體實施例 26之方法,其中步驟之溶液包含體積百分比15-20%之1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇與0.1-1%之氟化酸。 具體實施例 26:如具體實施例 22之方法,其中步驟之溶液包含體積百分比5-35 %之氟化醇與0.1-1%之氟化酸。

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第一次使用Saxenda善纖達注射筆時,醫師與護理師會親自詳細示範操作步驟,並協助注射藥劑,讓您6秒鐘就能輕鬆上手,不需要擔心使用問題與技巧。 儘管出於清楚理解之目的,已通過說明與實例之方式針對前述發明進行一些詳細描述,但本領域技術人員將理解到,在所附申請專利範圍之範疇內可實施特定改良與修正。 此外,本文中提供之各參考文獻皆全部併入本案以作為參考資料,如同各參考文獻之單獨併入以作為參考資料一般。 當本申請案與本文提供之參考文獻之間存在衝突時,以本申請案為主。 將所得之溶液裝載至RP-HPLC製備型管柱(其填充C8之10 μm二氧化矽,且直徑與長度為10 mm x 25 cm)上。 將所得之溶液裝載至RP-HPLC製備型管柱(其填充C8之10 μm二氧化矽,且直徑與長度為5 cm 利拉魯肽 x 22cm)上。

利拉魯肽: 利拉魯肽

在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為5 cm x 22 cm至8 cm x 12.6 cm時,第一次純化之流速為約50至200 mL/min。 在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為5 cm x 22 cm至8 cm x 12.6 cm時,第一次純化之流速為約100至160 mL/min。 在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為5 cm x 22 cm時,第一次純化之流速為約104 mL/min。 在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為8 cm x 12.6 cm時,第一次純化之流速為約152 mL/min。 在一些具體實施例中,當管柱之直徑與長度為10 mm x 250 mm時,第一次純化之流速為4至8 mL/min。

利拉魯肽: Q1. 使用Saxenda善纖達(瘦瘦筆)注射時,會不會很疼痛?

在一些具體實施例中,流動相B係以體積百分比5-25%至80-100%之線性梯度沖提。 在一些具體實施例中,流動相B係以體積百分比5-15%至90-100%之線性梯度沖提。 在一些具體實施例中,流動相B係以體積百分比5-25%至80-100%之線性梯度沖提,其中流動相A為含有0.2%三氟乙酸之水溶液;以及流動相B為含有約0.2%三氟乙酸之乙腈溶液。 在一些具體實施例中,流動相B係以體積百分比5-15%至90-100%之線性梯度沖提,其中流動相A為含有0.2%三氟乙酸之水溶液;以及流動相B為含有約0.2%三氟乙酸之乙腈溶液。

利拉魯肽: Q1. 使用Saxenda善纖達(瘦瘦筆)注射時,會不會很疼痛?

在某些具體實施例中,經純化的利拉魯肽組份的pH值為約7.5至約8.0。 在某些具體實施例中,流動相D的pH值為約7.5至約9.0,或約7.5至約8.5。 在某些具體實施例中,流動相D的pH值為約7.5至約8.5。 在某些具體實施例中,流動相C的pH值為約7.5至約9.0,或約7.5至約8.5。 在某些具體實施例中,流動相C的pH值為約7.5至約8.5。

利拉魯肽: 利拉魯肽

在某些具體實施例中,當管柱的直徑和長度為4.6 mm × 100 mm時,第二次純化的流速為約0.3至0.5 利拉魯肽 mL/min。 在某些具體實施例中,當管柱的直徑和長度為4.6 mm × 100 mm時,第二次純化的流速為約0.4 mL/min。 在某些具體實施例中,第一次RP-HPLC純化使用流動相A,其包括三氟乙酸和水;以及流動相B,其包括三氟乙酸和乙腈。 該方法包括: 將利拉魯肽粗肽溶於包含鹵化溶劑的溶液中;及 將該溶液置於RP-HPLC純化系統中純化,並收集經純化的利拉魯肽組份。 如請求項9之方法,其中第一次RP-HPLC純化使用包含三氟乙酸與水之流動相A及包含三氟乙酸與乙腈之流動相B。 如請求項1之方法,其中步驟之RP-HPLC純化系統包含第一次RP-HPLC純化與第二次RP-HPLC純化;第一次RP-HPLC純化係於pH值小於7之下進行;以及第二次RP-HPLC純化係於pH值大於7之下進行。

利拉魯肽: Q1. 使用Saxenda善纖達(瘦瘦筆)注射時,會不會很疼痛?

將所得之溶液裝載至RP-HPLC製備型管柱(其填充C8之10 μm二氧化矽,且直徑與長度為8 cm x 12.6 cm)上。 將所得之溶液置於具有製備型管柱(其填充C8之10 μm二氧化矽,且直徑與長度為4.6 mm x 250 mm)之RP-HPLC系統中。 在一些具體實施例中,經純化之利拉魯肽分液之pH值為約7.5至約8.5。 在一些具體實施例中,經純化之利拉魯肽分液之pH值為約8.0至約8.5。 在一些具體實施例中,經純化之利拉魯肽分液之pH值為約7.5至約8.0。 在一些具體實施例中,流動相C之pH值為約7.5至約9.0或約7.5至約8.5。

在某些具體實施例中,流動相A及流動相B各包括體積百分比0.1-0.3%的三氟乙酸。 在某些具體實施例中,流動相A及流動相B各包括體積百分比約0.2%的三氟乙酸。 在某些具體實施例中,流動相A為水中含0.2%三氟乙酸的溶液;流動相B為乙腈中含約0.2%三氟乙酸的溶液。 如請求項6之方法,其中步驟之溶液包含體積百分比15-20%之1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇與0.1-1%之氟化酸。